Aloysia Weber wurde am 12. November 1760 in Zell im Wiesental im Schwarzwald geboren. Ihr Vater Fridolin Weber war Musiker und Musiklehrer, ihre Mutter Cäcilia Weber Sängerin. Aloysia zeigte schon früh musikalisches Talent und begann bei ihrem Vater Klavier und Gesang zu studieren.
1777 zog Aloysia mit ihrer Familie nach München, wo sie im Alter von 17 Jahren ihr Bühnendebüt gab. Sie entwickelte sich schnell zu einer erfolgreichen Opernsängerin und sang Hauptrollen in Opern von Mozart, Gluck und anderen Komponisten.
1780 lernte Aloysia Wolfgang Amadeus Mozart kennen, der damals in München lebte. Mozart war sofort von Aloysia begeistert und komponierte mehrere Arien für sie. Die beiden waren verlobt, doch die Verlobung wurde 1781 gelöst.
Aloysia trat weiterhin erfolgreich als Opernsängerin auf, bis sie sich 1790 von der Bühne zurückzog. Sie heiratete 1795 den Hofmusikanten Joseph Lange. Das Paar hatte zwei Kinder, einen Sohn und eine Tochter.
Nach ihrer Pensionierung widmete sich Aloysia Weber dem Musikunterricht. Sie unterrichtete Schüler jeden Alters in Klavier und Gesang und war viele Jahre lang eine angesehene Musiklehrerin in Wien. Sie starb 1839 in Wien.