In den Filmen ist Mary Jane eine Highschool-Klassenkameradin und Freundin von Peter. Aufgrund von Missverständnissen und widersprüchlichen Gefühlen führen sie zunächst eine schwierige und angespannte Beziehung, aber je besser sie sich kennenlernen, desto tiefer wird ihre Verbindung. Mary Jane fühlt sich von Peters fürsorglicher Art und seinen heldenhaften Taten als Spider-Man angezogen.
Im Verlauf ihrer Beziehung wird Mary Jane zu einer Quelle der Unterstützung und Ermutigung für Peter. Sie ist sich seines Doppellebens als Spider-Man bewusst und steht vor Herausforderungen, während sie versucht, ihr eigenes Leben und ihre Gefühle mit Peters Superhelden-Aufgaben in Einklang zu bringen. Ihre Liebe zueinander bleibt jedoch trotz der Hindernisse, denen sie gegenüberstehen, stark.
In „Amazing Spider-Man 2“ wird Mary Janes Rolle erweitert, da sie sich stärker an Peters Superheldenaktivitäten beteiligt. Sie arbeitet mit Peter zusammen, um die Geheimnisse von Oscorp aufzudecken, und sieht sich mit persönlichen Problemen konfrontiert, während sie versucht, die Komplexität einer Beziehung mit Spider-Man zu meistern.