* Papier: Er verwendete hauptsächlich schweres, strukturiertes Papier das den Details und der Vielschichtigkeit seiner Arbeit standhalten konnte. Er verwendete oft Whatman-Papier , ein damals beliebtes hochwertiges Zeichenpapier.
* Bleistifte: Audubon verwendete Graphitstifte in verschiedenen Qualitäten zum Umreißen und Schattieren.
* Aquarell: Er verwendete Aquarelle um seinen Zeichnungen Farbe zu verleihen, wobei er häufig Lavierungen übereinander legt, um Tiefe und Realismus zu erzielen.
* Tinte: Manchmal benutzte er Tinte zum Erstellen von Details oder zum Umreißen.
* Buntstift: Gelegentlich verwendete Audubon Buntstift für dezente Schattierungen oder Highlights.
Audubon war bekannt für seine akribische Liebe zum Detail und seine innovativen Techniken. Für seine atemberaubenden Illustrationen verwendete er oft eine Kombination dieser Materialien.