Hauptfiguren:
* Sherlock Holmes: Der brillante Detektiv, bekannt für sein deduktives Denken und seine Beobachtungsgabe.
* Dr. John H. Watson: Holmes' treuer Freund und Chronist, der oft als Standpunkt des Lesers dient.
* Mary Morstan: Eine junge Frau sucht nach Informationen über das Verschwinden ihres Vaters und das mysteriöse „Zeichen der Vier“, das sie erhält.
* Jonathan Small: Der bösartige, aber letztendlich tragische Drahtzieher hinter dem Diebstahl des Agra-Schatzes und des „Zeichens der Vier“.
* Thaddeus Sholto: Jonathan Smalls ehemaliger Komplize, der einen Teil des Agra-Schatzes erbt. Er wird ermordet, bevor die Geschichte beginnt.
* Athelney Jones: Ein Detektiv von Scotland Yard, der von Holmes oft wegen seiner übermäßig methodischen und weniger intuitiven Vorgehensweise verspottet wird.
Andere wichtige Charaktere:
* Frau. Hudson: Die Vermieterin von 221B Baker Street, wo Holmes und Watson wohnen.
* Der Tonga-Stamm: Eine Gruppe von Eingeborenen von den Andamanen, die Jonathan Small treu ergeben sind und seine Pläne in die Tat umsetzen.
* Das „Zeichen der Vier“: Der Name für vier einzigartige Objekte:eine silberne Anstecknadel, eine kleine, verzierte Schachtel, ein Stück Bleirohr und ein Hundehalsband. Diese Gegenstände stehen im Zusammenhang mit dem Diebstahl des Agra-Schatzes.
Nebencharaktere:
* Bartholomäus Sholto: Thaddeus‘ Bruder, der einen Teil des Agra-Schatzes erbt und zum Ziel von Jonathan Small wird.
* Frau. Sholto: Die Mutter von Thaddäus und Bartholomäus, die um ihre Sicherheit besorgt ist.
* Frau Morstan (Marys Mutter): Eine Frau, die einst in Thaddeus Sholto verliebt war und unter mysteriösen Umständen starb.
* Inspektor Bradstreet: Ein Inspektor von Scotland Yard, der mit Athelney Jones zusammenarbeitet.
Es ist wichtig zu bedenken, dass sich die Geschichte zwar hauptsächlich auf die Hauptfiguren konzentriert, viele Nebencharaktere jedoch der Handlung Ebenen hinzufügen und zur Gesamtatmosphäre des Romans beitragen.