- Elizabeth Shaw: Ein junger Wissenschaftler, der zur Besatzung des Raumschiffs Prometheus gehört. Ihr Glaube treibt sie dazu, die Ingenieure, die Schöpfer der Menschheit, zu finden.
- David: Ein Android, der auch Mitglied der Prometheus-Crew ist. Er ist hochintelligent und neugierig, aber auch rücksichtslos und berechnend.
- Weyland: Der CEO von Weyland Corp., dem Unternehmen, das die Prometheus-Expedition finanziert hat. Er ist besessen davon, die Ingenieure zu finden und Unsterblichkeit zu erlangen.
- Meredith Vickers: Der Vertreter der Weyland Corp. auf der Prometheus. Sie ist eine rücksichtslose und ehrgeizige Geschäftsfrau, die bereit ist, alles zu tun, um ihre Ziele zu erreichen.
- Janek: Der Kapitän der Prometheus. Er ist ein erfahrener Astronaut, der versucht, die Sicherheit seiner Crew zu gewährleisten und gleichzeitig die Missionsziele zu erreichen.
- Holloway: Ein Biologe auf der Prometheus, der Shaws romantischer Partner ist. Er ist fasziniert von den Ingenieuren und ihren Kreationen.
- Fifield: Ein Geologe auf der Prometheus, der unbedingt den außerirdischen Mond erforschen möchte. Er ist rücksichtslos und impulsiv und bringt sich und seine Kameraden oft in Gefahr.